조성(Typical Formulation)
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성분* |
gm/litre |
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Peptone |
20.0 |
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Sorbitol |
10.0 |
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Bile salts No.3 |
1.5 |
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Sodium chloride |
5.0 |
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Neutral red |
0.03 |
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Crystal violet |
0.001 |
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Agar |
15.0 |
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pH 7.1 ± 0.2 @ 25°C |
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*성능표준을 위해 조절될
수 있음 |
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조제 (Directions)
1리터의 정제수에 51.5g을 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후 멸균 페트리 접시에 붓는다.(SMAC)
Cefixime-Tellurite
Supplement (SR0172)를 첨가하는 경우:
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Vial contents |
per vial |
per litre |
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Potassium tellurite |
1.25mg |
2.5mg |
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Cefixime |
0.025mg |
0.05mg |
1리터의 정제수에 51.5g을 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다. 50°C로 식힌 후, 설명서에 따라 재구성한 2바이알의 SR0172를 무균적으로 첨가하고 잘 혼합한 후 멸균 페트리 접시에 붓는다.(CT-SMAC, TC-SMAC)
사용(Technique)
1. 조제법에 따라 배지를 만든 후 평판에 붓는다. 필요시 한천 표면을 건조시킨다.
2. 분리된 집락을 얻기 위해, 시료 (식품, 분변 등) 현탁액을 평판에 접종한다.
3. 35°C에서 24시간 배양한다. Doyle 및 Schoeni10의
보고에 의하면 35-37°C가 E.coli O157의 성장에 최적인 온도이다. 44-45.5°C에서의 성장은 빈약하며, 48시간 동안 배양해도
마찬가지다.
24시간 이후에 평판을 판독하는 것을 피해야 한다. Sorbitol 발효 집락의 색상 강도가
약해지고 비 발효 집락들과의 대조가 감소되기 때문이다. Pseudomonas, Proteus,
Klebsiella 등의 기타 그람-음성 미생물은 Sorbitol
MacConkey Agar에 성장할 수 있지만 집락 성상의 차이로 일반적으로 구별할 수 있다.
진단 시약인 Escherichia coli O157 Latex test(DR0620)를
이용하여 의심집락에 대해서 즉시적인 확인 시험이 가능하다.
주의사항 (Precautions)
거의 대부분의 E.coli O157 균주들이 Sorbitol MacConkey Agar상에서
전형적인 성상을 보이지만 일부 균주는 그렇지 않다11. Sorbitol MacConkey Agar를 E.coli 의 VTEC 균주들을 검출하기 위한 유일한 수단으로 사용해서는 안된다. 일부
비 독성 균주들이 sorbitol을 발효시키지 못하기 때문이다12.
SMAC 및 CT-SMAC은 숙련된 미생물학자에 의해 체외진단용으로만 사용한다. 유효기간이
초과되었거나 어떤 성능저하의 흔적이 있는 경우 사용하지 않는다.
제한점 (Limitations)
비전형적인 효소 패턴을 가지는
미생물들이 비정상적인 결과를 나타낼수도 있다.