조성(Typical Formulation)
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성분* |
gm/litre |
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Peptone |
5.0 |
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`Lab-Lemco’ powder |
5.0 |
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Glucose |
5.0 |
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Disodium phosphate |
4.0 |
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Ferrous sulphate |
0.3 |
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Bismuth sulphite indicator |
8.0 |
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Brilliant green |
0.016 |
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Agar |
12.7 |
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pH 7.6 ± 0.2 @ 25°C |
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*성능표준을 위해 조절될
수 있음 |
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조제 (Directions)
1리터의 플라스크에 든 500ml의 정제수에 20.0g을
현탁하고 자주 교반하면서 열을 가한다. 배지가 끓기 시작하면 30초간
뭉근히 끓여서 한천을 완전히 녹인다. 50-55°C로 식힌 후 잘 혼합하고 두꺼운 평판을 만든다 (평판 당 25ml 배지). 뚜껑을
닫지 않은 상태로 응고시킨다. 많은 주의를 기울이고 적절한 상층 공간(head
space)이 확보되면 더 큰 부피로 평판을 만들 수도 있다.
사용 전에 평판을 건조하고 초과 건조는 피한다. 잘 조제된 배지는 부드럽고, 창백한 짚색으로 크림 같이 불투명하며, 지시약의 침전이 없어야 한다.
과열하지 말
것 – 오토클레이브 하지 말 것
사용(Technique)
이 배지는
직접평판법 이나 증균배지로부터 salmonellae의 분리를 위한 다른 선택적 장내세균용 한천배지와
병행하여 사용될 수 있다8. 따라서 다음의
계획이 인용될 수 있다.
Bismuth Sulphite Agar 및 다음 중 하나 이상에 직접 접종한다:
Desoxycholate
Citrate Agar (CM0227) 또는 DCLS Agar (CM0393)
XLD Agar (CM0469)
Brilliant Green
Agar (CM0329)
MacConkey Agar
No.3 (CM0115)
동시에 증균
액체 배지, 예를 들면 Selenite Broth
Base(CM0395)+Sodium Biselenite LP0121, Mueller-Kauffmann Tetrathionate Broth
(CM0343) 또는 Mueller-Kauffmann Tetrathionate-Novobiocin
Broth (MKTT-n) (CM1048), 에 접종한다. 12-18시간 배양 후 Bismuth Sulphite Agar 및 기타 선택배지상에 계대 배양한다. 18시간
배양 후 평판을 관찰하고 의심 집락을 동정 배지, 예를 들면 Kligler
Iron Agar (CM0033)에 계대 배양한다.
모든 음성
평판은 48시간 동안 배양해야 한다.
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Organism |
Appearance |
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Salmonella typhi |
18시간 배양 후 집락 주위에 검정색 영역과 금속성 광채가 있는 검정색의 토끼눈 집락. 48시간 배양 후에는 균일하게 검정색 |
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Other Salmonella species |
18시간 후 다양한 집락 성상으로 검정색, 녹색, 또는 투명하고 점성이 보인다. 48시간 후에는 균일하게 검정색 집락이 관찰되고 종종 폭넓은 배지의 염색과 뚜렷한 금속성 광채를 가짐 |
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Other organisms, e.g. coliform
bacteria, Serratia, Proteus species |
일반적으로 억제되지만 금속성 광채가 없거나 배경 배지의 염색이 있는 둔한 녹색 또는 갈색 집락을 종종 보인다. |
주의사항(Precautions)
조제된 평판 배지는 2-8°C에서 최대2일간 보관하고 이 기간 이후에 brilliant green은 산화되어 녹색 배지를 나타내고 일부
salmonellae에 억제적일 수 있다.
Shigella
종들은 일반적으로
완전히 억제된다.
Salmonella sendai, Salmonella
cholera-suis, Salmonella berta, Salmonella gallinarum, Salmonella abortus-equi는 현저히 억제된다9.
스프레딩법이 잘 분리된 집락을 만들어 낸다. 만일 성장이 너무 많거나 합류적(confluent)이라면 전형적인 집락 특성이 나타나지 않을 것이다; Salmonella typhi 집락은 이러한 환경하에서 밝은 녹색을 보인다. 따라서 의심이 된다면 배지상의 거의 모든 성장 집락을 추가 시험에 포함시켜야 한다.