조성(Typical Formulation)
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성분* |
gm/litre |
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Peptone |
10.0 |
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Glucose |
5.0 |
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Disodium hydrogen phosphate anhyd. |
6.45 |
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Potassium dihydrogen phosphate |
2.0 |
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Ox Bile purified |
20.0 |
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Brilliant green |
0.0135 |
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pH 7.2 ± 0.2 @ 25°C |
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*성능표준을 위해 조절될
수 있음 |
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조제 (Directions)
1리터의 정제수에 43.5g을 첨가한다. 250ml 플라스크에 100ml을 분주한 후 100°C에서 30분간 가열한다. 흐르는 물에 플라스크를 신속히 냉각시킨다. 이 배지는 열에 민감하며 오토클레이브를 금지한다.
사용(Technique)
1. Tryptone
Soya Broth (CM0129)에 식품 검체를 1:10으로 희석하고 25°C에서 2~8시간동안 배양하여 쇠약해진 세포를 소생시킨다. 액체층이 1센치미터 이상 깊게 되지 않게 한다. 30초간 플라스크를 시계 방향
및 반시계 방향으로 변경해가며 흔들어서 내용물을 혼합해준다. 연속적으로 3회 수행한다.
2. 소생된 현탁액에 10배 부피의 EE Broth를 첨가한다.
3. 위와 같이 흔들어서 내용물을 혼합한다. 검체의 부피가 큰 경우, 2배 농도의 EE Broth를 사용하여 검체 부피와 같은 양을 혼합해준다.
4. 찾으려는 장내세균군의 그룹에 따라서
호열성 세균의 경우 44°C에서 18시간, 중온성 세균의 경우 32°C에서
24/48시간, 호냉성 세균의 경우 4°C에서 10일간 배양한다.
5. 배지를 살펴보아 장내세균군의 추정적
증거인 노란색을 띠는 녹색으로 색상이 변화했는지와 함께 탁도를 관찰한다.
6. LF 또는 NLF 상태의 확정을 위해 Violet Red Bile Glucose Agar
(CM0485) 또는 lactose 함유 배지상에 계대배양을 한다. 추가 시험은 분리된 균주의 동정을 확인하는 것이 이루어져야 한다.
주의사항 (Precautions)
배지의 과열은 피한다, 2배 농도의
배지는 특히 주의한다.