조성
| 성분* | gm/litre |
| Yeast extract | 5.0 |
| Bacteriological peptone | 10.0 |
| Sodium thiosulphate | 10.0 |
| Sodium citrate | 10.0 |
| Ox Bile | 8.0 |
| Sucrose | 20.0 |
| Sodium chloride | 10.0 |
| Ferric citrate | 1.0 |
| Bromothymol blue | 0.04 |
| Thymol blue | 0.04 |
| Agar | 14.0 |
| pH 8.6 ± 0.2 @ 25ºC | |
| *성능표준을 위해 조절될 수 있음 | |
조제
88g을 1리터의 정제수에 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 오토클레이브를 하지 말 것. 추가로 열을 가하지 않고 페트리접시에 배지를 붓고 건조시킨 후 사용한다.
설명
Kobayashi, Enomoto, Sakazaki and Kuwahara1 등은 Nakanishi2의 선택적 분리 한천배지로부터 TCBS 배지를 개발하였다.
Oxoid TCBS배지는 Kobayashi 등의 조성을 따르지만, 한 가지 예외는 Nakanishi 및 Kobayashi가 보고한 결점이 없는 특수하게 처리된 ox bile을 사용한다.
이 배지 조성의 복잡성은 성장을 단일화 시키는 것을 표준화 시키기 어렵다는 것을 말해준다. 몇 가지 조사에 의하면 다양한 회사에서 만들어진 TCBS 배지의 제조단위(batch)간의 변이가 있음이 알려져 있다3,4,5,6.
이 배지 제조사의 품질관리는 정상적인 장내 균총을 충분히 억제시키지만 특정 Vibrio 종을 억제 시키지 않는 것이 아주 중요하다. West 등7은 Oxoid TCBS 배지는 만족스런 제품의 기준에 가장 가깝다는 것을 보여주었다. 세계보건기구(WHO)는 TCBS 배지상에서 Vibrio 종들의 회복에 대해서 최소 인정 가이드라인을 마련하였다8.
옥소이드의 배지는 Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, 그리고 기타 대부분의 Vibrios의 성장에 적합하다9.
분변에 존재하는 대부분의 장내세균군은 최소 24시간 동안 완전히 억제된다. Proteus 종 및 Enterococcus faecalis의 미약한 성장은 나타나지만 그 집락들은 비브리오 집락들로부터 쉽게 구별된다.
Oxoid TCBS 배지는 완전배지이며 첨가제의 첨가나 혈액의 무균 첨가 등이 불필요하여 멸균 후 추가적인 첨가가 필요한 Lauryl Sulphate Tellurite Agar 보다 상당한 장점이 있다. 이러한 편리성과는 별도로, tellurite 배지들에 비해 Vibrio 종들에 대해 우수한 성장 특성을 보여준다. 비브리오가 아닌 미생물을 억제시키는 반면, 35ºC 밤샘배양후 병원성 비브리오의 빠른 성장을 촉진해준다. 환경 검체에서 기타 비브리오의 분리를 위해서는 보다 낮은 온도인 20-30ºC에서의 배양이 필요하다.
사용
분변 또는 증균 배지(예. Alkaline Peptone Water)의 계대배양물을 TCBS 배지 표면에 도말한다.
임상 검체의 경우 18~24시간동안 35ºC에서, 환경 검체의 경우 보다 낮은 온도에서 배양한다.
TCBS상의 배양체는 배양기에서 꺼내면 즉시 평가해야한다: Vibrio cholerae 같은 Vibrio 배양체의 노란색 집락은 실온에 노출되면 녹색으로 변할 수 있기 때문이다9.
주의사항
TCBS 배지상의 다양한 Vibrio 종들의 동정은 추정적이므로 확정을 위해서는 추가적인 시험이 필요하다.
TCBS 배지의 노란색 집락은 불충분한 oxidase 반응을 의미한다.
TCBS 배지에서 취한 집락은 점착성(sticky)이므로 슬라이드 응집 시험에서 약한 반응을 보여주므로 응집시험전에 영양 배지(nutrient agar)에 계대배양이 필요하다.
Vibrio vulnificus의 일부 균주는 30ºC에서 더 좋은 회복을 보여준다.