조성(Typical Formulation)
|
성분* |
gm/litre |
|
Special peptone |
15.0 |
|
Corn starch |
1.0 |
|
Sodium chloride |
5.0 |
|
Dipotassium hydrogen phosphate |
4.0 |
|
Potassium dihydrogen phosphate |
1.0 |
|
Agar |
10.0 |
|
pH 7.2 ± 0.2 @ 25°C |
|
|
*성능표준을 위해 조절될
수 있음 |
|
설명(Description)
옥소이드사의 GC Agar Base는 육류 및 식물 효소 분해물의 혼합으로 이루어진 Special Peptone (LP0072)이 포함된 조성이다. 녹말이 첨가되어 neisseria에 의해 생성된 독성 대사산물들이 흡수된다. 인산 완충성분이 포함되어 그 미생물의 생존에 영향을 주는 아민(amine) 생성으로 인한 pH 변화를 방지해준다.
조제 (Directions)
Thayer Martin
Medium with GC Supplement
1. 235ml의 정제수에 18g의
GC Agar Base를 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
2. 5g의 haemoglobin 분말(LP0053)에 250ml의 정제수를 첨가하여 2% 용액을 만든다. 물을 첨가하는 동안 용액을 계속 교반해준다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
3. 15ml 정제수에 1바이알의 무균 GC Supplement SR56*을 녹인다.
4. GC
Supplement 용액 SR56*을 50°C로 식힌 235ml의 GC Agar Base에 무균적으로 첨가하고 잘 혼합한다. 50°C로 식힌 250ml의 haemoglobin
용액을 GC Agar Base + SR56* suppement에 첨가한다. 거품이 생기지 않게 잘 혼합하고 멸균 페트리 접시에 붓는다.
Thayer Martin Medium with Vitox and
either VCN or VCNT Antibiotic Supplement
1. 240ml의 정제수에 18g의 GC Agar Base를 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
2. 5g의 haemoglobin 분말(LP0053)에 250ml의 정제수를 첨가하여 2% 용액을 만든다. 물을 첨가하는 동안 용액을 계속 교반해준다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
3. 제품설명서에 따라 1바이알의 Vitox(SR0090)을 녹인다.
4. 제품설명서에 따라 1 바이알의 VCN Antibiotic Suppplement(SR0101) 또는
VCNT Antibiotic Supplement(SR0091)을 녹인다.
5. Vitox 용액을 50°C로 식힌 240ml의 GC
Agar Base에 무균적으로 첨가한다.
6. 재구성한 VCN 또는 VCNT를 GC Agar
Base + Vitox에 무균적으로 첨가한다.
7. 50°C로 식힌 250ml의 Haemoglobin 용액을 GC Agar Base+Vitox+Antibiotic에 무균적으로 첨가한다. 공기
방울이 생기지 않게 잘 혼합한 후 멸균 페트리 접시에 붓는다.
‘Transgrow’ Medium
이 배지는 Thayer Martin Medium 변형 배지들에 기술된 방법으로 조제한다. 단, 한 가지 예외는 GC Agar Base 18g당 5g의 Agar를 추가해야 한다. 조제된
배지는 유리병에 사면배지 형태로 준비된다. 필요한 여분의 glucose는
첨가제 형태로 제공된다.
GC Medium derived from the New York City
Formulation with LCAT or VCAT antibiotic supplement
1. 425ml의 정제수에 18g을 현탁하고 끓여서 완전히 녹인다. 121°C에서 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
2. 1바이알의 Yeast Autolysate Supplement(SR0105)를 15ml 정제수에
녹인다.
3. LCAT(SR0095)
또는 VCAT(SR0104)을 10ml의 정제수에 녹인다.
4. 50°C로 식힌 GC Agar Base에 50ml의 laked
horse blood (SR0048), 재구성한 Yeast Autolysate Supplement,
재구성한 Antibiotic Supplement (LCAT 또는 VCAT)를 무균적으로 첨가한다. 거품 또는 공기방울이 생기지 않게
잘 혼합한 후 멸균 페트리접시에 붓는다.
본 조성은 Young의 논문14에
기반한 NYC Medium11,12,13의 변형이다. 여기에는 창안자가 권고한 더 높은 농도의 glucose는 당 발효
시험이 수행될 수 있을 정도로 감소되었다.
사용(Technique)
1. 지시사항에 따라 배지를 조제하고 평판을 준비한다.
2. 평판에 배양체 면봉을 발라서 접종한다. 또는 평판이 적절한 부위가 접종되게 큰 “Z” 형태가 선호될 수
있다. 미생물의 적절한 퍼짐을 위해 멸균 루프로 평판을 스트리킹할 수도 있다.
3. 적절한 장치를 사용하여 37°C, 최소 70% 습도, 5~10%이산화탄소 조건의
밀봉된 용기에서 배양한다.
4. 배양 24시간 후에 평판을 관찰하고, 음성일 경우 추가로 24시간 더 배양한다.
5. 임질 구균으로
의심되는 집락을 그람 염색, oxidase 시험, 당 발효
반응으로 동정한다.