조성
성분* | gm/litre |
Peptone | 10 |
Lactose | 10 |
Ox bile (purified) | 20 |
Brilliant green | 0.0133 |
pH 7.4 ± 0.2 @ 25°C | |
*성능표준을 위해 조절됨 |
조제
40g을 1리터의 정제수에 녹인다. Durham 튜브가 든 용기에 분주한 후 121'C 15분간 오토클레이브로 멸균한다.
설명
이 배지는 장유래 호기성균군의 선택적인 회복을 위해 Durham 및 Schoenlein2에 의해 고안되었다. 답즙(bile)과 brilliant green 성분들이 그람 양성균을 억제하면서 유당 발효에 의한 신속한 기체 생성으로 장유래 호기성균군을 인식하게된다.3 이 배지의 억제 성분은 영양 및 무기질 성분들과 균형을 이루고 있어 Clostridium 및 Bacillus 포자가 위양성을 나타내지 않는다. 이 배지는 물, 유제품, 식품 분석에 사용된다.4,5,6,7,8
4-methylumbelliferyl-β-D-glucuronide (MUG) (BR0071)를 첨가하여 Escherichia coli의 검출을 향상시킬 수 있다.
사용
Escherichia coli의 존재를 알아보기 위해서는 이 배지를 44 ± 1°C에서 48시간 배양한다. 탁도 생성 및 기체 생성은 양성을 의미한다. Tryptone Water(CM0087) 또는 Peptone Water(CM0009)으로 44°C에서 인돌 생성시험을 수행하여 E. coli임을 확인하다.
Water plant control 시험에서, <1ml에서 10ml 부피의 물을 사용하며, 과대 희석되지 않도록 주의한다. 따라서 1ml 정도의 물을 10ml의 배지에 첨가한다. 10ml의 물은 10ml의 2배농도의 배지에 첨가한다. 35°C에서 48시간 배양한 후, 기체가 생성되면 장유래 호기성균군임을 추정적으로 의미한다.
식품연무질(food macerates)은 10배수로 희석하여 1:10의 비율로 액체배지에 첨가한다. 검체 부피가 크면 2배농도의 배지를 사용할 수 있다. 44°C에서 48시간동안 배양하여 E.coli를 검출하고 32°C에서 25~48시간동안 배양하여 장유래 호기성균군을 검출한다. 또는 4°C에서 10일간 배양하여 호냉성 대장균군을 검출한다.
이 배지는 세균이 성장하면 탁해지며 노란색을 띠는 녹색이 된다. 풍부한 기체 생성이 동반된 경우, 장유래 호기성균군의 추정적 증거가 되며 확정 시험을 실시해야 한다.
주의사항
2배 농도배지는 오토클레이브하지 않는다.
답즙/brilliant green에 의한 억제가 식품으로 인해 감소되는 경우, 그람 양성의 포자생성 생물이 기체를 생성할 수도 있다.